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自放大RNA(Selfamplifying RNA,saRNA)能够以自身的RNA序列为模板,进行自我复制。应用于在mRNA疫苗时,较低剂量的saRNA可以实现相似的免疫原蛋白表达水平和对病毒的同等保护效力,同时最大限度地减少递送材料(如阳离子脂质体)的使用,从而有助于控制成本和潜在的副作用。宜明生物独创的多顺反子自放大RNA(polycistronic / multicistronic selfamplifying RNA, psaRNA / msaRNA),在保留传统单顺反子saRNA自放大效果的同时,能够在一条RNA链上进行多顺反子RNA的独立自放大和蛋白表达。该方法简单易行,可以定制化无差别的在一个细胞表达多个目的基因。
psaRNA在细胞中的复制和表达示意
技术策略 | IRES(Internal Ribosome Entry Site,IRES)元件 | 自剪切多肽2A(Selfcleaving 2A peptide,2A)元件 | 多顺反子自放大RNA(polycistronic / multicistronic selfamplifying RNA, psaRNA / msaRNA |
优势 | |||
具有不依赖帽子结构而独立募集核糖体的功能,进而可以启动下游基因的翻译 | 顺反子属于同一编码框架,表达强度趋于一致 | 能够在一条RNA链上进行多顺反子RNA的独立自放大和蛋白表达,可以定制化无差别的在一个细胞表达多个目的基因 | |
缺点 | |||
与上游顺反子相比,下游顺反子的表达水平比较低(通常为上游的10 %20 %) | 会在目标蛋白的N端或C端增加额外的2A肽残留序列,这可能会对目的蛋白的功能造成一定的影响 | / |