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GMP 腺相关病毒
GMP 腺相关病毒(AAV)

腺相关病毒(AAV)具备安全性高、免疫原性低、高效持续表达和易于操作等优点,是基因治疗领域备受瞩目的病毒载体。然而AAV生产过程复杂 ,其中放量生产以及产能等一直是AAV商业化生产的主要瓶颈。宜明生物致力于病毒载体的研发与制备,其 Ubri-AdvancedTM GMP AAV生产平台工艺可扩展,可实现50L-200L-500L-2000L商业化生产规模、具备成本效益、可提供覆盖全生产流程的解决方案。

项目经验

依托全球的前瞻技术研发中心,宜明生物在AAV载体药物开发领域建立了强大的技术储备池,始终与全球前沿市场的技术保持同步。丰富生产和工艺开发经验,符合NMPA,FDA和EMA等相关法规要求的cGMP厂房设计,已成功帮助客户完成4项AAV载体IND项目获批进入临床,并成功交付多个200L、500L的临床批生产订单。



60+批次GMP级
AAV病毒制备

8+不同血清型生产经验,AAV2/2、rAAV2/5、rAAV2/8、rAAV2/9 等

专业的生产和检测团队,确保产品高质量交付

定制化方法学开发与验证服务,满足项目的个性化需求

工艺特点
高产悬浮无血清293XS细胞
可实现200-2000L规模生产
病毒产量高,低空壳率

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生产流程

宜明生物的AAV制备平台,采用无血清悬浮培养方式,包括上游的细胞培养、质粒转染以及裂解澄清等,下游的两步柱层析、无菌灌装和储存,整个过程应用一次性以及密闭设备。


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质量检测

宜明生物拥有专业的GMP质量控制 (QC)团队,擅长方法学开发,可提供GMP质粒、AAV 临床级等产品的质量控制方案。宜明生物的质量控制平台涵盖了化学、微生物学、生物化学等方面的检测,可提供多种技术解决方案,助力客户开发、建立基因治疗产品的检测方法,满足所有GMP项目的检测要求。


检测项目检测方法
鉴别
外壳蛋白鉴别CE
AAV基因鉴别一代测序(目的基因)
纯度
外壳衣壳蛋白纯度CE
空壳率
电镜
AUC检测
含量
病毒物理滴度ELISA
病毒基因组滴度ddPCR
病毒感染滴度TCID50
比活性感染性滴度、基因组滴度
杂质
宿主细胞DNA残留量QPCR
质粒DNA残留量QPCR
核酸酶残留量ELISA
宿主细胞蛋白残留量ELISA
E1A残留量QPCR
Tween-20残留HPLC
PEI残留HPLC
AAV亲和配基残留ELISA
安全性
细菌内毒素凝胶限度试验法
复制性病毒(rcAAV)培养法+QPCR
无菌直接接种法
支原体检查PCR
物理检查
外观目视法
装量
可见异物灯检法
pHpH值测定法
渗透压冰点渗透压仪
不溶性微粒
光阻法《中国药典》2020版通则0903
DLS企业内控
项目管理

宜明生物组建了高效的项目管理团队,完善的项目沟通机制和全方面的IP保护,确保每一个CDMO项目的高质量实施交付。



项目管理团队

专业的项目管理团队
对客户需求及时响应

项目沟通机制

定期例会汇报项目进度

线上现场多渠道高效沟通

全方位IP保护

安全的信息加密系统

企业内部项目代码管理

项目交付

宜明生物建立了成熟的病毒载体工艺平台,丰富的项目经验确保可以实现快速的开发生产流程,为客户提供完整的临床级IND项目服务,包括细胞库建库、工艺开发、方法学开发、稳定性研究,中试批生产等,亦可以根据项目需求提供定制服务。另外,为满足IND申报的要求,还可提供临床级AAV批生产记录、批检验记录以及相关验证资料等。


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资料下载
宜明生物一站式AAV CDMO服务手册.pdf
常见问题
Q
眼部产品适用哪个AAV血清型?
A

因为眼部产品是倾向于神经元,实际上所有的AAV产品对神经元都有偏好性。目前用于试验类型以AAV2、AAV5和AAV8居多,考虑到专利问题,改造载体如AAV2-7M8、AAV2-tYF等,已被用于临床研究,目前宜明生物参与支持申报的AAV项目中,涵盖了AAV2及其改造载体,AAV8等。

Q
对于AAV空壳率的检测,其放行标准是什么?
A

FDA和CDE并没有对空壳率检测设定明确的法规标准。然而,在行业实践中,普遍认为空壳率不应超过30%。具体数值会因AAV的血清型以及表达基因而异,同时也会受到生产工艺的影响,例如,超速离心工艺纯化后的空壳率可能会更低。

Q
AAV病毒的免疫原性如何控制?
A

免疫原性可以从几个角度考虑。虽然AAV免疫原性不高,但是剂量过高还是会引起一定的免疫反应,所以如何提高药效降低注射剂量是需要从载体设计上进行考量;另外就是产品的纯度,尽量提高实心率,减少杂质是降低免疫反应的必要的措施。

Q
AAV病毒制备过程中哪些环节成本较高?
A

上游主要成本在于培养基、质粒和转染试剂,质粒是最主要的成本;下游成本集中在填料;成品检测的成本也是占比较大的比例。

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